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编号:13792712
黄芪甲苷改善高糖受损内皮祖细胞生物学功能的实验研究(3)
http://www.100md.com 2020年11月1日 《世界中医药》 202021
     1.2.3.2 黄芪甲苷对高糖下EPCs生物学功能影响的研究 1)EPCs CCK8增殖检测:取对数期EPCs,胰酶消化,调整细胞悬液浓度,分于96孔板,1×105/孔。置于37 ℃、5% CO2温箱培养24 h,使细胞贴壁。取处于指数生长期的细胞接种到96孔板上。板中配制100 μL的细胞悬液。在37 ℃,5% CO2的条件下预培养24 h。实验组加入100 mg/L AS-IV进行联合培养,NC组及HG组加等量PBS液;3组细胞在培养箱孵育培养48 h。每孔加入10 μL CCK8溶液。在培养箱内孵育4 h。酶标仪测定吸光度。避光保存在室温条件下,设置对照孔,每组设3复孔。2)EPCs黏附能力检测:用胰酶消化贴壁EPCs使细胞脱落,形成500 μL的细胞悬液并计数,然后将EPCs均匀分于24孔板并于37 ℃、5% CO2孵育培养1 h,实验组用100 mg/L AS-IV进行干预,NC组及HG组加等量PBS液;培养8 h后,将EPCs均匀接种在包被有大鼠纤维连接蛋白培养板并培养30 min,2个随机200倍视野计数EPCs。3)EPCs迁移能力检测:先用marker笔在6孔板背后每隔1 cm划横线一道 ......
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